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RNase R
來源: | 作者:geneseed | 發布時間: 2018-03-29 | 12915 次瀏覽 | 分享到:



Ribonuclease R (RNase R)

貨號

試劑

規格

保存條件

R0301

RNase R (20U/μL)

500 U

-20

10X Reaction Buffer

1 mL


RNase R (Ribonuclease R)是一種來源于大腸桿菌RNR超家族的3’-5’核糖核酸外切酶,可從3’-5’方向RNA逐步切割核苷酸和三核苷酸。RNase R可消化幾乎所有的線性RNA分子,但不易消化環形RNA、套索結構或3突出末端少于7核苷酸的雙鏈RNA分子。RNase R常用于基因表達和可變剪切研究,可消化線性RNA以使環形RNA (circRNA)套索結構RNA (lariat RNA)得到富集。




產品組分:

Storage Buffer

50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1% Triton? X-100, 50% Glycerol

10X Reaction Buffer

200 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 M KCl, 1 mM MgCl2


單位定義

標準反應體系下,37,10 min1 μg poly(A)轉化溶核苷酸所需酶量定義為一個活力單位(U)。


反應體系

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 0.1 mM MgCl2, 37℃孵育。

注:1RNase R0.1-0.5 mM Mg2+存在時活性最高,反應EDTA可能降低RNase R活性,此時可額外添加MgCl2使Mg2+濃度最高達到0.5 mM。2)孵育后可于70,10 min使酶滅,進行下游實驗(逆轉錄);也可不滅活,直接純化后進行下游實驗。


質量
控制:

SDS-PAGE檢測純度>99%;Total RNARNase R消化后進行RT-qPCR檢測,線性RNA豐度明顯降低,環形RNA豐度基本不變。


參考
文獻:

1. Cheng ZF, Deutscher MP. J. Biol. Chem. 2002; 277:21624–21629.

2. Suzuki H et al.. Nucleic Acids Res. 2006; 34(8), e63.

3. Vincent HA, Deutscher MP. J Biol Chem. 2006 Oct 6; 281(40):29769-75.


說明書下載:
R0301 Ribonuclease R (RNase R)